植物组织果糖含量测试盒糖代谢

产品简介：

储存条件
2-8℃
中文名称
植物组织果糖含量测试盒糖代谢
有效期
6个月
单位
盒
英文名称
Plant Tissue Fructose Content Assay Kit
检测方法
可见分光光度法 Spectrophotometer
规格
50T/48S

产品型号：BC2450-50T/48S

更新时间：2024-07-09

厂商性质：生产厂家

访问量：2401

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产品分类

PRODUCT CLASSIFICATION

生化检测试剂盒-常量法

谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）活性检测总谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性检测 α-L-岩藻糖苷酶（AFU）活性检测硫代葡萄糖苷含量检测生物碱含量检测总氧化状态（TOS）检测 α-基丁酸脱氢酶（α－HBDH）活性检测 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性检测水溶性物质羟自由基清除能力检测植物铵态氮含量检测试剂盒血清（浆）二胺氧化酶（DAO）活性检测试剂盒细胞酸性磷酸酶细胞碱性磷酸酶果胶系列转氢酶系列光合作用系列维生素系列糖原系列糖异生系列蛋白含量测定系列其它系列信号系列土壤系列离子系列 P450系列糖代谢系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代谢系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循环系列线粒体呼吸链系列酯酶系列氨基酸代谢系列氮代谢系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列维生素C代谢系列谷胱甘肽系列辅酶Ⅱ系列辅酶Ⅰ系列

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产品介绍

酰基转移酶（AAT）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2350
规格：10T/9S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体15 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体10 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	粉剂×1支	-20℃保存
试剂三	液体1.5 mL×1支	2-8℃保存
试剂四	液体1mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

提取液：内含不溶物，使用前摇匀；
试剂二：临用前加蒸馏水1mL充分溶解，未用完的试剂2-8℃可以保存2周；

产品说明：
AAT是一个多功能蛋白大家族，主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应，在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。

AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇，同时还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，测定412nm吸光度增加速率，来计算AAT活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。4℃，15000 g离心20min，取上清液待测。
2、血清（浆）样本：直接检测。（若液体有浑浊则离心后进行测定）
二、测定步骤

分光光度计预热30min 以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。
试剂一在37℃水浴保温20min以上。
样本测定：

试剂名称（μL）	空白管	测定管
蒸馏水	100	-
上清液	-	100
试剂一（预热）	700	700
试剂二	50	50
试剂三	100	100
试剂四	50	50

将上述试剂按顺序加入1mL 玻璃比色皿中，加试剂四的同时开始计时，充分吹打混匀，在412nm波长下记录第10s时的初始吸光度A1和130s后的吸光值A2，计算ΔA空=A2空-A1空、ΔA测=A2测-A1测、ΔA=ΔA测-ΔA空。空白只需做1-2次。
三、AAT活性计算
1、按样本蛋白浓度计算
单位的定义：37℃中每mL反应体系下每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1个酶活单位。
AAT (U/mg prot) =ΔA÷0.001÷(Cpr×V样) ÷T= 5000×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
2、按样本质量计算
单位的定义：37℃中每mL反应体系下每克组织每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1个酶活单位。
AAT (U/g 质量) =ΔA÷0.001÷(V样÷V样总×W) ÷T=5000×ΔA÷W
3、按血清体积计算
单位的定义：37℃中每mL反应体系下每mL血清每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1个酶活单位。
AAT (U/mL 血清) =ΔA÷0.001÷V样÷T=5000×ΔA
Cpr：上清液蛋白浓度，mg/mL，需要另外测定；V样：加入反应体系中上清液体积，0.1mL；W：样本质量，g；V样总：提取液体积，1mL；T：反应时间，2min。
注意事项：

当吸光值大于1时，建议稀释后测量。
如果ΔA测小于0.01，可以延长反应时间，如测定10s和310s的吸光度，计算时相应修改计算公式中反应时间。

实验实例：

取0.1g肾脏加入1mL提取液进行样本处理，取上清后稀释4倍后按测定步骤操作，测得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA测=A2测-A1测=0.665-0.479=0.186、ΔA=ΔA测-ΔA空=0.186-0.004=0.182，按样本质量计算酶活得：AAT (U/g 质量) =5000×ΔA÷W×4（稀释倍数）=36400 U/g 质量。
取兔血清直接按照测定步骤操作，测得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA测=A2测-A1测0.622-0.521=0.101、ΔA=ΔA测-ΔA空=0.101-0.004=0.097，按血清体积计算酶活得：AAT (U/mL 血清) =5000×ΔA=5000×0.097=485 U/mL 血清。

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